活性蛇粉的免疫调节作用及机理

    本文报道hxs的免疫调节作用，并探讨其作用机理。Hxs 4.5g5～8d对Cy诱导的小鼠DTH反应增高或降低呈反向调节，也可拮抗Cy诱导的小鼠溶血素生成量下降,表现出双向调节特征。Hxs本身无有丝分裂原样作用，但终浓度45和450ng/ml可促进ConA诱导小鼠脾淋巴细胞的增殖；同样浓度还可促进NDV诱导的人脐血白细胞产生IFNa。Hxs的这种免疫增强作用可能是其体内向上恢复免疫功能的机理之一。Hxs5～10g·kg^-1·d^-1 ip4～8d对DXM抑制小鼠溶血素的生成及DTH反应无明显拮抗作用，同时hxs还可使正常小鼠和DXM处理的SRBC致敏小鼠血浆CS水平下降。
        乌梢蛇是游蛇科动物药具有较强双向免疫调节与抗炎,止痛作用，其主要有效成份为(含骨胶原)Zaocys dhumnades  (hxs)可有效降低白介素-2.抑制环氧化酶-2来抑制前列腺素生成,具有多种药理作用，除已报道的镇静、镇痛、[1]等作用外，还具有抗炎、治疗佐剂性关节炎(未发表资料)等作用。已知炎症与免疫是一个不可分割的整体，且实验预试表明hxs具有免疫恢复作用，故本文着重研究其免疫调节作用及作用机理。一般药理学试验说明，该药对呼吸、心电、血压.肝肾均无影响

　　材料与方法

　　小鼠脾细胞产生溶血素的定量测定 将BALB/c 或C₅₇BL/6小鼠(♂，18±SD2g)，每鼠ip10%SRBC(V/V)0.2ml致敏，5d后断头处死，参照Simpson[2]法测定脾细胞溶血素释放量，用721型分光光度计测溶血程度吸光值(A)，l为413nm。

　　检测小鼠迟发型超敏反应(DTH)参照文献[3]并加以改良。将50ml 1%二硝基氟苯(DNFB)丙酮麻油溶液涂于去毛的ICR小鼠(♂,20±2g)腹部，4d后于每鼠右耳涂以10μl同样浓度的DNFB, 24h后，颈椎脱臼致死，剪下左右耳廓，各取直径为8mm的耳片称重，以左右耳片重量之差表示肿胀程度。

　　血浆皮质酮(CS)放射免疫测定 采用皮质酮放免药盒按说明书提供的方法并参照文献[4]，取50μl受试小鼠血浆进行测定。

　　hxs对小鼠脾淋巴细胞体外增殖的影响[5]

　　将C₅₇BL/6小鼠(20±2g，♀♂兼用，2月龄)的脾细胞悬液，在有或无ConA存在的条件下与hxs一起培养。细胞终浓度2×10⁶个单核细胞/ml，hxs终浓度4.5-450ng/ml，总容量0.2ml，于37℃ 5% CO₂培养箱中孵育72h，终止前16h加入[³H]TdR(7.5kBq,,育毕用多头细胞收集器收集细胞于69#纤维滤片上，用液闪仪(FJ-210)测cpm值。

　　hxs对人脐血白细胞体外诱生干扰素(IFNa)的影响

　　1.IFNa的诱生: 取新鲜抗凝人脐血，分为4份，每份50ml，一份加入hxs(终浓度45ng/ml)，其余三份先加入新城鸡瘟病毒(NDV，F系，终浓度100HA/ml)，置37℃温育1h，离心，去上清，再加入等量含3%灭活人血清的MEM培养液，取其中一份作为对照，另两份分别加入hxs(终浓度45和450ng/ml)，参照文献[6]方法将上述4份样本37℃旋转培养18h离心(2000r/min,20min)，取上清液，用6mol/L HCl酸化使pH降至2。置4℃冰箱5d后，再用6mol/LNaOH